本文对GB-进行简单汇总
1试剂和材料
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂;水为符合GB/T规定的一级水。
1.1氯霉素标准品:含量≥97%。
1.2内标物:氘代氯霉素标准品:含量为μg/mL(作为内标物标准贮备液)。
1.3甲醇:色谱纯。
1.4乙腈:色谱纯。
1.5乙酸乙酯。
1.6氯化钠。
1.7正己烷。
1.8C18固相萃取柱:mg/3mL，或相当者。
1.94%氯化钠溶液:取氯化钠4g，用水溶解并稀释至mL。
1.10μg/mL氯霉素标准贮备液:精密称取氯霉素标准品10mg，于mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为μg/mL的氯霉素标准贮备液。-20℃以下保存，有效期1年。
1.11μg/L氯霉素标准工作溶液:精密量取pg/mL氯霉素标准贮备溶液μL，于mL量瓶中，用50%乙腈溶解并稀释至刻度，配制成浓度为μg/L的标准工作液。2℃~8℃保存，有效期1个月。
1.μg/L氘代氯霉素标准工作溶液:精密量取氘代氯霉素标准品20μL，于0mL量瓶中，用50%乙腈溶解并稀释至刻度，配制成浓度为20μg/L的氘代氯霉素标准工作液。2℃~8℃保存，有效期三个月。
2仪器和设备
2.1液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源。
2.2分析天平:感量0.g。
2.3天平:感量0.01g。
2.4旋涡振荡器。
2.5振荡器。
2.6组织匀浆机。
2.7冷冻离心机。
2.8旋转蒸发仪。
2.9离心管:50mL。
2.10鸡心瓶:50mL。
2.11固相萃取装置。
2.12氮吹仪。
2.13滤膜:0.22μm。
3试料的制备与保存
3.1试料的制备
取适量新鲜或冷藏的空白或供试牛奶，混合，并使均质。
取均质后的供试样品，作为供试试料。
-取均质后的空白样品，作为空白试料。
-取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
3.2试料的保存-20℃以下保存。
4测定步骤
4.1提取
取试料10g士0.05g，于50mL离心管中，加氘代氯霉素内标工作液μL，再加乙酸乙酯20mL，振荡15min，r/min离心10min，取乙酸乙酯层液于鸡心瓶中。再加乙酸乙酯20mL重复提取一次，合并两次提取液于鸡心瓶中，于45℃水浴旋转蒸发至干。用4%氯化钠溶液5mL溶解残留物，加正已烷5mL振荡混合1min，静置分层，弃正已烷液。再加正已烷5mL，重复提取一次。取下层液备用。
4.2净化
C18柱依次用甲醇5mL和水5mL活化，取备用液过柱，控制流速1滴/(3s~4s)，用水5mL淋洗，抽干，用甲醇5mL洗脱，收集洗脱液，于50℃氮气吹干。用50%乙腈1.0mL溶解残余物，涡旋混匀，滤膜过滤，供液相色谱串联质谱测定。
4.3标准曲线的制备
精密量取μg/L氯霉素标准工作溶液和20μg/L氘代氯霉素内标工作溶液适量，用流动相稀释，配制成氯霉素浓度为0.10、0.25、0.50、1.0、2.0、5.0μg/L，氘代氯霉素浓度为5μg/L的系列标准溶液，供液相色谱串联质谱仪测定。以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
4.4测定
4.4.1液相色谱条件
4.4.1.1色谱柱:C18(mm*2.1mm，粒径5μm)，或相当者。
4.4.1.2柱温:30℃。
4.4.1.3流速:0.2mL/min。.
4.4.1.4进样量:20μL。
4.4.1.5运行时间:8min。
4.4.1.6流动相:乙腈+水(50+50，体积比)。
4.4.2质谱条件
4.4.2.1电离模式:ESI。
4.4.2.2扫描方式:负离子扫描。
4.4.2.3检测方式:多反应检测。
4.4.2.4电离电压:2.8kV。
4.4.2.5源温:℃。
4.4.2.6雾化温度:℃。
4.4.2.7锥孔气流速:50L/h。
4.4.2.8雾化气流速:L/h。
4.4.2.9数据采集窗口:8min。
4.4.2.10驻留时间:0.3s。
4.4.2.11定性、定量离子及对应的锥孔电压和碰撞电压:见表1。
表1氯霉素定性、定量离子对和锥孔电压及碰撞电压
4.4.3测定法
取试样溶液和相应的标准溶液，作单点或多点校准，按内标法以峰面积比计算。对照溶液及试样溶液中氯霉素和氘代氯霉素的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。试样溶液中的离子相对丰度与标准溶液的离子相对丰度比符合表2的要求。
表2试样溶液中离子相对丰度的允许偏差范围
4.5
空白试验
除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
5检测方法灵敏度、准确度和精密度
5.1灵敏度
本方法检测限为0.01μg/kg，定量限为0.1μg/kg。
5.2准确度
本方法在0.02μg/kg~0.10μg/kg添加浓度水平上的回收率为50%~%。
5.3精密度
本方法的批内相对标准偏差≤17%，批间相对标准偏差≤20%。