新思路比较转录组比较基因组研究小麦高效

土壤氮素短缺是限制作物生产的主要因素,每年农业消耗的肥料中约有60%是氮肥,增加氮肥施用提高了产量但带来了污染和资源浪费。从全基因组水平上解析作物氮高效的遗传及分子机制,培育氮高效作物新品种,提高作物的氮素利用效率,是解决我国与世界农业的面源污染、实现农业可持续发展和保护环境的关键。氮素利用效率(NUE)涉及氮的吸收、运输、同化、储存和再利用等过程,由许多基因控制,对小麦的高氮利用率的作用机制没有得到很好的解释。

年,中国科学院大学遗传发育所发表于《MolecularPlant》(IF=21.)的“ComparativegenomicandtranscriptomicanalysesuncoverthemolecularbasisofhighnitrogenuseefficiencyinthewheatcultivarKenong”文章,通过比较转录组和比较基因组的研究为阐明小麦NUE提供了机会。

一、实验设计

本研究组装了小麦KN基因组,系统地鉴定了与氮吸收和代谢相关的基因,并在全基因组水平上表征了KN的NUE机制,利用基因组、转录组、表观组及重要基因功能揭示了驱动高氮利用率(KN)与低氮利用率(J)两个小麦品种之间NUE差异的分子机制。

图实验设计

二、实验结果

1、小麦KN基因组组装,注释和分析

为了研究小麦NUE的分子机制,使用二代测序、PacBio测序和Hi-C分析的组合策略对小麦KN的基因组进行测序和组装。组装的小麦基因组大小为14.77Gb,scaffoldN50是21.87Mb。通过Hi-C分析,将14.24Gb组装序列分配给21条染色体。对低NUE品种J的基因组进行了40x重测序,通过比对KN基因组检测到存在/缺失变异和拷贝数变异,并在J中鉴定了34,个基因缺失,长度范围从25bp到56kb;鉴定了个重复序列,长度范围从bp到kb。通过对小麦KN基因组注释,研究确定了3,,个转座因子(TE,图1D),两个LTR逆转录转座子超家族,即RLG(Gypsy)和RLC(Copia),以及一个DNA转座子超级家族DTC(CACTA),约占TE总拷贝数的75%,占TE总序列长度的90%以上。预测了总共,个高置信基因,根据基因序列及注释信息,将个基因注释为氮代谢基因(NMGs)。NMG包含各种基因家族,包括硝酸盐转运蛋白(NPF、NRT2、NAR2、CLC、SLAH)、硝酸还原酶(NIA、NIR)、铵转运蛋白(AMT)、铵同化蛋白(GS、GOGAT、GDH、ASN、AspAT)、氨基酸转运蛋白(APC)和与氮代谢相关的转录因子(TF)。NMGs主要位于染色体的长短臂的两端,每条染色体上有28-55个NMG。Hi-C结果分析表明,小麦KN染色体形成了与大麦和玉米相似的三维U型结构,即典型的“Rabl”构型,并对21条染色体的


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