蘑菇培养物的保存方法多种多样,其中可以选择最适合特定需要的一种,例如保存相对较短的时期或较长的时期。本章概述了各种方法的特点。更详细地说明微生物,包括真菌,读关于蘑菇菌种的特殊储存细节,特别是使用液氮,2保存方法的选择取决于许多因素,但必要设备和资金的可用性通常是决定要使用的技术。
A、短期储存
传统的蘑菇培养方法是周期性转移。以这种方式维护的培养基可随时用于继代培养,而不会延迟培养基地恢复例如,在液氮中长期储存时发生。在短期储存中影响文化保存成功的三个因素:(1)转移,
(2)维护介质,
(3)储存温度。
理论上,转移不应该太频繁,以减少污染和技术错误(例如,标签错误、变体或突变体的选择以及文化的实际损失通过断裂或错位)。继代培养之间的时期因物种而异,但是一般来说,是在3到12个月的范围内。保存重复培养物是一种有效的预防措施防止损失,并且希望定期执行简短的特征描述,以监视理想特性的任何变化。
一。文化实践
菌落生长边缘的菌丝生长应用于继代培养。与原始培养物的偏差可以通过菌丝体转移来检测。表演菌丝体应该持续检查,虽然不是所有的退化症状都可以在菌丝期发现。通常发现的退行性症状是生长,菌丝体薄且外观弱,或菌丝体呈团状或蓬松但生长速度正常。
一个生长缓慢的菌丝体需要更多的时间进行定植并趋向于携带病毒颗粒。毛茸茸的菌丝体使谷物粘在一起,很难散开在堆肥中比正常谷物。它倾向于形成“基质”,产量较低。菌丝体应丢弃这些类型的。在我们实验室,食用菌菌株在完全琼脂培养基上继代培养或马铃薯葡萄糖琼脂培养基倾斜(每个菌株三个倾斜)。草菇在32∞C下孵育7-10天。其他菌株在25∞C下孵育10至14天,直到斜面上长满了菌丝。一旦草菇菌株完全生长,它们被保存在室温下。
草菇应每2个月传代一次。香菇、平菇和蘑菇菌株可以保存在5∞C的冰箱中,它们应该每6个月传代一次。
2。下层
实验室培养基,如马铃薯葡萄糖琼脂、麦芽琼脂、燕麦琼脂和全琼脂培养基(0.5gMgSO4·7H2O;0.46gKH2PO4;1gK2HPO4;2g蛋白胨;20g葡萄糖;20g琼脂;2g酵母提取物;0.5毫克盐酸硫胺素;1升蒸馏水)是常用的。一般来说营养性弱的培养基是首选的,因为它降低了机体的代谢率和从而延长转移之间的时间。
但是,应该记住的是在实验室培养基中用琼脂进行纯培养不是一个自然条件,要获得最充分的开发中遇到的自然条件应尽可能模拟。应变在人工培养条件下容易变弱。众所周知,培养基可以作为一种选择剂,因此,它可以影响某些突变出现的频率例如毛茸茸的菌丝体。
三。小平边培养瓶
年,Wilson和Plunkett21描述了使用小(15毫升)香水瓶进行培养真菌。从那时起,这种瓶子在许多实验室中得到了有利的应用在美国。瓶约为4.5日元4.2日元1.9厘米,有一个脖子,使瓶盖打开时瓶子的高度为6厘米。每个瓶子的容量约为20毫升。可以将56个这样的瓶子放在一个外部尺寸为28.5¥的铝制平底锅中19.0¥4.0厘米,在五金店很容易买到。塑料盖应该做一种耐热化合物,如电木,这样它可以反复蒸压而不损失形状且不散发甲醛蒸汽,这对