中乔新舟Raw2647细胞培养指南

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产品介绍:RAW.7细胞源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。RAW.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW.7细胞分解红血球,但对肿瘤靶细胞无作用

1、细胞复苏:将含有1m细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5ml培养基混合均匀。在RPM条件下离心3min,弃去上清液,补加4-6ml完全培养基吹匀。然后将细胞悬液加入培养瓶中过夜,第二天检查细胞密度并换液。

2、细胞传代:当细胞密度达到80%-90%,即可进行传代培养。

弃去培养液上清,用不含钙、镁离子的PBS(BC-BPBS-01)润洗细胞2次。

加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-EDTA)BC-CE-于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,镜下观察细胞大部分圆缩并脱落,肉眼观察细胞培养瓶上部细胞呈挂线状滑落,迅速拿回操作台,于手心轻敲几下培养瓶,可见细胞呈沙粒状滑落,加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

轻轻吹打细胞,完全脱落分散后吸出,在RPM条件下离心3min,弃去上清液,补加1-2ml吹匀。2.4按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞重悬按1:2到1:4的比例分到新的培养瓶中。

3、细胞冻存冻存条件:20%FBS的培养基+10%DMSO(或使用细胞冻存液BC-CFM-01),2-8℃放置2小时,再将冻存管置于梯度降温冻存盒并放于-80度过夜,第二天转入液氮罐;




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