动物组织培养技术是生命科学、医学、药学、农学等研究领域中广为应用的一门技术。
其具有以下突出优点:
1、研究对象为活的细胞,可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等;
2、可以人为地严格控制研究条件,便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响,有利于单因子分析;
3、研究的样本可以达到比较均一性。常用的细胞系均是性质均一的细胞,需要时还可采用克隆化等方法使细胞进一步纯化;
4、研究的内容便于观察、检测和记录。体外培养的细胞可采用显微镜,电镜等直接观察记录,充分满足实验的要求。
因此,该技术被广泛应用于细胞生物学、组织学与胚胎学、肿瘤学、免疫学、营养学、药理学、毒理学等学科实验室中。
动物组织细胞培养技术整个操作流程以及培养环境,需根据实验室生物安全等级划分为P1、P2、P3和P4四个等级的实验室。其中P1安全等级最低,P4安全等级最高。
关于实验室生物安全等级的分类,您可以查看我们之前的文章《实验室生物安全等级分类及设计要求您了解吗?》
常规高校、科研机构、企业建立的实验室设计,生物安全等级达到P2即可。今天东南仪诚为大家介绍动物组织培养实验室常用仪器设备配置清单。
一、动物组织培养的分类及基本概念1、组织培养(TissueCulture)指的是从体内取出组织,在模拟体内生理环境,无菌、适当温度和一定营养条件下,使之生存和生长并维持其结构和功能的方法。
2、细胞培养(CellCulture)培养物是单个细胞和细胞群。
3、器官培养(OrganCulture)培养的是器官的原基、器官的一部分或整个器官,使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。
培养过程中,需要工作环境和条件必须保证无微生物污染,不受其他有害因素影响,环境要求无菌、清洁、空气清新和干燥。
二、动物组织培养实验室的构成通常,动物组织培养实验室主要由准备室、缓冲室和培养室构成。
(一)准备室
准备室主要用于培养器皿的洗涤、消毒、培养物的准备和物资保存等。为避免相互间不必要的生物或化学污染,也可以由数间小室。准备室应具备良好的通风和采光,但应避免灰尘污染。
功能:培养用具的清洗、包装、消毒、物品贮藏、试剂放存
洗涤区:设有水槽、自来水龙头、洗涤池,和清洗设备,地面应设置地漏,以利水渍快速干燥。
消毒区:供物品和器械消毒及烘干用,常用消毒方法有干热法和湿热法。因设备耗电量大、产热量高,应单独配备供电线路。
制水区:用于制备符合实验要求的清洁水,以供洗涤培养器具和配制培养液用。要求供、排水方便。
准备室常用仪器设施:
(1)水纯化装置:
纯水蒸馏器:
亚荣自动纯水蒸馏器
纯水机:
雷磁超纯水系统
(2)高压灭菌锅
上海博迅立式压力蒸汽灭菌器(SII系列)
(3)电热干燥箱
上海博迅电热鼓风干燥箱
上海一恒鼓风干燥箱
(4)冰箱
中科都菱低温冰箱
(5)天平
瑞士普利赛斯天平
上海菁华电子天平
(6)pH计(酸度计)
雷磁PHS-3C型pH计
(7)磁力搅拌器
大龙磁力搅拌器
(8)超声波清洗器
上海知信超声波清洗器
(9)储物柜
未消毒物品和已消毒物品需分开放置
(10)试验台(水槽、供水系统等)
(11)消防设施
(二)缓冲室(3-5平米)
缓冲室常设于培养室外,要求清洁、干燥和不通风,并设置紫外灯等必要的环境消毒设备。
配备设施:衣柜、无菌服、帽子、口罩、消毒液等。
(三)培养室(可多间):
培养室,又被称无菌室,是专门用于进行细胞培养和各种无菌操作的实验室,要求清洁、干燥、无菌、不通风。室内除放置各种仪器设备外,还应有放置无菌器具的橱柜和一定的操作空间。
1、培养室常用仪器设备:
(1)超净工作台/生物安全柜
上海博迅净化工作台
上海博迅生物安全柜
(2)低温冰箱和超低温冰箱
中科都菱超低温保存箱
(3)二氧化碳培养箱
上海智城二氧化碳培养箱
(4)低速离心机、低温高速离心机
中科中佳低速离心机
艾本德eppendorf高速冷冻离心机R
(5)二氧化碳钢瓶
(6)液氮罐
乐山东亚液氮罐
(7)恒温水浴锅
上海博迅恒温水浴锅
(8)紫外灯
(9)倒置显微镜和电脑
(10)储物柜
2、常用培养器皿和器具
(1)滤器:不锈钢滤器,高压灭菌,过滤1L溶液
(2)移液器和吸头
艾本德EppendorfResearchplus手动移液器
艾本德EppendorfXplorerplus电动移液器
艾本德子品牌Lavibe吸头
(3)细胞培养瓶
玻璃细胞培养瓶,可反复洗涤灭菌大中小三种规格;塑料细胞培养瓶,无菌一次性使用。
(4)离心管
艾本德子品牌Lavibe离心管
(5)细胞培养皿/板
(6)培养液瓶:玻璃,可反复洗涤灭菌
(7)酒精灯或煤气灯
(8)移液管和吸管
(9)含75%酒精棉瓶
根据研究方向不同,动物组织培养实验室还可以配套建立其他研究实验室,如细胞遗传学实验室、细胞生物学实验室、分子生物学实验室、电生理实验室、生化实验室、形态学工作室等。
还可以进一步准备小型孵化箱、超低温冰箱、酶标仪、紫外分光光度计、流式细胞仪、电热恒温培养箱、制冰机等设备。
中科都菱超低温冰箱
普朗酶标仪
上海仪电分析紫外分光光度计
迈瑞流式细胞仪BriCyteE6
上海智城电热恒温培养箱ZXSP-B
上海知信制冰机
三、注意事项1、培养室内要完全密闭,保持恒定的温度,位置最好设在阴面,阳光不能直接照射的地方,防止室内温度增高;
2、天花板的高度不要超过2米,以保证紫外灯的有效杀菌效应;
3、门一般用拉门,以防止空气流动;
4、天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角,要镶瓷砖或涂油漆,这样设计,一是便于清洗和消毒,另外也不易在墙角堆积灰尘。
以上设备清单仅供大家参考,具体配置需根据各位老师、使用者的实际需求策划,希望东南仪诚今天的分享能对大家有所帮助。
如需了解更多实验室仪器设备详细参数、使用说明和技术问题,欢迎登陆实验室信息网或