细胞冻存
细胞冻存遵循慢冻的原则。细胞冻存需要程序降温盒（-1度/分钟）、冻存管、细胞冻存级二甲基亚砜（DMSO）。DMSO的作用是在细胞东村过程中防止细胞内部形成冰晶结构，保护细胞不受破坏。冻存液基本上是70%基本培养基+20%血清+10%DMSO，可以适当提高血清浓度，但是DMSO的浓度最好是在5-15%，过高或过低都会对细胞造成伤害。
液氮罐将细胞按照上一章节的方式进行胰蛋白酶消化，并以配制细胞冻存液重悬细胞。这时重悬细胞的力度不宜过大，应轻柔且避免产生气泡。细胞浓度维持在个/毫升，然后浆细胞悬液转移到冻存管，并用封口膜密封，做好标记转入程序降温盒，放入-80度冰箱，过夜转移到液氮。在放入细胞到程序降温盒时，要保证程序降温盒温度恢复到室温，并且检查盒中异丙醇的含量不要低于临界线。若实验条件有限，没有程序降温盒可用，也可以按照4℃—10分钟，20℃—30分钟，80℃—16～18小时(或隔夜)，液氮长期储存这样的步骤冻存。但是-20℃不可超过1h，以防止细胞内产生冰晶的造成细胞大量死亡。细胞放入液氮后，应详细记录细胞所在位置，以免混淆。同时，液氮罐应放入冷库，以减少液氮挥发。并定期检查液氮剩余量，并及时补充。
细胞培养无菌操作台(超净工作台)细胞复苏
细胞复苏遵循快融的原则。准备37℃水浴锅，若没有水浴锅，可以用烧杯代替水浴锅，但是水温要略高于37℃。液氮取出细胞，迅速放入热水中，这是最好是用个PE手套将细胞包裹着再放入热水中，待细胞融化后转入细胞培养操作台。先加入适量培养基到离心管，再将冻存管中的细胞转移到离心管中。加入培养基的目的是稀释DMSO以减少对细胞的损害，因为常温下高于1%的DMSO对细胞是有毒性的，更何况是10%的DMSO，所以在离心前要将DMSO稀释。经过转3分钟离心后，收集细胞沉淀并重悬接种到培养瓶，培养观察。有些不适合离心的细胞，如自然杀伤细胞NK，可以将细胞接种后，等待4-6小时换液以除去细胞中DMSO。可以根据实验需要调整接种密度，一般来讲，复苏的细胞要等传代2-3代，待细胞状态稳定后再进行相关实验。