C2C12细胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌细胞系的亚株。该细胞分化较快，可形成能收缩的微管，产生特异的肌肉蛋白。在骨形态形成蛋白（BMP-2）的作用下，该细胞可由成肌细胞分化为成骨细胞。检测发现该细胞鼠痘病毒阴性。
细胞复苏
溶解细胞过程要迅速；已溶解的冻存细胞不能在常温下存放太久，需要尽快离心去除DMSO。
细胞冻存
冻存条件
60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存。
细胞冻存步骤
1.常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中。
2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的大小计算所需冻存细胞数(参考数量:5x10^5~5x10^6cells/mL)。
3.离心收集细胞。(参考离心条件:4℃，g，离心4~6min)。
4.收集培养细胞沉淀，彻底弃去离心管中的上清液。
5.加入适量的HyCyte一步冻存液于离心管中。轻柔地混匀细胞，制成细胞混合液。
6.将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1mL或1.5mL。
7.立即将冻存管直接置于-80°C冰箱中(直立放置)完成"一步"冻存操作,24小时后移入液氮或者-80C长期保存。
细胞冻存时，尽量吹散细胞，注意控制吹打力度。
细胞培养条件
培养基：DMEM-H+10%FBS+1%P/S
推荐传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次
培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃
传代操作
去掉培养皿中的培养基，加入PBS进行冲洗，并去上清;
加入胰酶进行润洗，并去上清;
放入CO2培养箱消化2-4min;
加入完全培养基终止消化，并吹打均匀。
常见问题及解答
为什么会出现空泡？
可能是铺板时铺得不够均匀，局部过于密集，密集地方的细胞就开始状态变差、空泡增多。也可能是血清差，需要更换优质血清，及时换液。
为什么细胞长得慢？
可能是细胞接种得太少，细胞密度太低。可以先培养，然后消化重新铺瓶，提高密度培养。
为什么细胞状态变差，容易漂？
可能是血清问题，建议换血清，并注意血清要程序解冻，不能水浴化开；也有可能是细胞生长密集，需要及时传代，并不是细胞长满才传代，当有个别地方长得过于密集，容易叠加的时候应该就要传代了。
注意
在培养过程中，保持细胞汇合度30％～90％
每一步操作都要轻柔小心，以免细胞受损
选用优质培养基，减少有害物质对细胞的刺激
作者：海星生物